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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒提取不出来，求解决办法
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爱如风过3610

金虫 (正式写手)

[求助] 质粒提取不出来，求解决办法 已有7人参与

50ml培养基加2ml菌液摇菌，摇多长时间提质粒比较好啊，过夜12小时太长吗？时间太长会质粒丢失吗？
具体实验步骤，我是要把之前得到的96孔板里的菌混合起来摇菌测序，由于比较多，每一个孔取5微升，然后全部取出来后，加2ml混合菌到50ml培养基中过夜摇，第二天菌生长正常，但是提不出质粒，不知哪里有问题，是因为摇的时间太长吗？
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加油加油！！！
1楼 2016-07-15 10:27:42
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y383514131

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-07-16 22:08:09
一般质粒上都会有特定的抗性基因，如果加入相应抗性基因，含有相应质粒的菌就会成为优势菌，所以可以考虑加千分之一的相应抗性
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此事说来终觉浅，莫问出处便是真
6楼2016-07-16 21:53:20
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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)
你加抗生素了吗？可能是杂菌污染

发自小木虫Android客户端
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2楼2016-07-15 21:38:30
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bright8

铁杆木虫 (著名写手)
不是都用试剂盒么？

发自小木虫Android客户端
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3楼2016-07-15 23:07:17
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曼陀罗的祈祷

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-07-16 22:08:00
我一般都是50ml离心管加15ml培养基，菌液先活化2小时再接种1:100的比例接，然后培养14个小时吧，第二天用试剂盒提质粒，一般都能提出来，你的提不出来是不是传代次数太多，时间久了质粒丢失，之前有没有保存好的质粒，重新转化一次试试？
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想做个有趣的人，却在逗比的道路上越走越远~
4楼2016-07-16 10:19:05
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