24小时热门版块排行榜    

查看: 568  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

nandaxq

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助:设计引物一对

因要用Real-Time做组织表达,要求引物的特异性很强,甚至二聚体都没有最好,

而本人,设计的引物,验证比较差,特请大家帮帮忙,先谢谢了!

引物设计要求:

1.PCR产物:200-250 bp

2.退火温度:55

序列如下:

5’至3‘

ACCATCCAGTGGACCATCATCATTAACATTTTGGTGTGGTTGGGCAGCTTCCTTCTGAGCATCCCGGTCATGATATATGCTAAAGTCATCTCCAAAAAGAACATGAACATATGTATGATTAACCTGGATGGGCCTCAGGATATGTACTGGTACACACTCTACCAGTCCATGCTGGGTTTCATCGTCCCCCTCATTATAATAAGCACATTTTACACTCTCACTCTGTACCACGTGTTCCGCTCCATCCGGCGGGTCAAACGCAAGCAGTCAGTGTGGGCCAAGCGGGCCACTAAGACAGTTGTGATGGTGATCGCCCTGTTCTTGGTCTGCTGGTCTCCCTATCATGTCATCCAGG
TGATCAACCTCAGCATCTGCCTG
回复此楼
引诱若够,女人无所谓正派;筹码若高,男人无所谓忠诚;骑着白马的唐僧;带着翅膀的鸟人。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nandaxq

铜虫 (小有名气)

真是太感谢你啦,马上下订单,呵呵,希望可以一步到位,我的内参基因也是55度,

THANKS!
引诱若够,女人无所谓正派;筹码若高,男人无所谓忠诚;骑着白马的唐僧;带着翅膀的鸟人。
5楼2008-11-10 21:12:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

lifei-fei

金虫 (著名写手)

伊丽莎白

恩,是要做定量PCR的引物吗?我帮你设,先占住,等会儿把引物发上来!
做有意义的事就是好好活着!
2楼2008-11-10 20:36:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nandaxq

铜虫 (小有名气)

恩,是的,做荧光定量用,由于上次自己设计的效果比较差,都被老板K了一顿,浪费他钱,还请多多帮忙,谢谢!
引诱若够,女人无所谓正派;筹码若高,男人无所谓忠诚;骑着白马的唐僧;带着翅膀的鸟人。
3楼2008-11-10 20:40:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifei-fei

金虫 (著名写手)

伊丽莎白

★ ★ ★ ★ ★
nandaxq(金币+5,VIP+0):太感谢了!希望一举命中!
Sense       5>CAGTCCATGCTGGGTTTC>3    53     216bp
Anti-sense 5>CAGGCAGATGCTGAGGTT>3    59

Sense       5>TGGATGGGCCTCAGGATA>3     55    212bp
Anti-sense 5>GAACCAGCAGACCAAGAA>3      50

本人做了好多基因的real-time RT-PCR,引物的退火温度在52-60之间,均匀55度都能扩增,内参的退火温度正好也是55度!帮你设计了两条,一般出现一个峰值就可以用,你都合成吧,选择一个好点的!
做有意义的事就是好好活着!
4楼2008-11-10 21:09:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 02:21 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:40 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:52 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见