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求助：设计引物一对
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因要用Real-Time做组织表达，要求引物的特异性很强，甚至二聚体都没有最好， 而本人，设计的引物，验证比较差，特请大家帮帮忙，先谢谢了！ 引物设计要求： 1.PCR产物：200-250 bp 2.退火温度：55 序列如下： 5’至3‘ ACCATCCAGTGGACCATCATCATTAACATTTTGGTGTGGTTGGGCAGCTTCCTTCTGAGCATCCCGGTCATGATATATGCTAAAGTCATCTCCAAAAAGAACATGAACATATGTATGATTAACCTGGATGGGCCTCAGGATATGTACTGGTACACACTCTACCAGTCCATGCTGGGTTTCATCGTCCCCCTCATTATAATAAGCACATTTTACACTCTCACTCTGTACCACGTGTTCCGCTCCATCCGGCGGGTCAAACGCAAGCAGTCAGTGTGGGCCAAGCGGGCCACTAAGACAGTTGTGATGGTGATCGCCCTGTTCTTGGTCTGCTGGTCTCCCTATCATGTCATCCAGG TGATCAACCTCAGCATCTGCCTG |
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3楼2008-11-10 20:40:46
lifei-fei
金虫 (著名写手)
伊丽莎白
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1070.1
- 红花: 2
- 帖子: 1577
- 在线: 4.2小时
- 虫号: 588454
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- 专业: 作物分子育种
2楼2008-11-10 20:36:48
lifei-fei
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nandaxq(金币+5,VIP+0):太感谢了！希望一举命中！
nandaxq(金币+5,VIP+0):太感谢了！希望一举命中！
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Sense 5>CAGTCCATGCTGGGTTTC>3 53 216bp Anti-sense 5>CAGGCAGATGCTGAGGTT>3 59 Sense 5>TGGATGGGCCTCAGGATA>3 55 212bp Anti-sense 5>GAACCAGCAGACCAAGAA>3 50 本人做了好多基因的real-time RT-PCR，引物的退火温度在52-60之间，均匀55度都能扩增，内参的退火温度正好也是55度！帮你设计了两条，一般出现一个峰值就可以用，你都合成吧，选择一个好点的！ |
4楼2008-11-10 21:09:01
5楼2008-11-10 21:12:12