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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 聚蔗糖 和 蔗糖 用作密度梯度离心介质时区别大吗
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南山五柳生

铁虫 (小有名气)

[求助] 聚蔗糖 和 蔗糖 用作密度梯度离心介质时区别大吗

最近做叶肉细胞的原生质体分离，原生质体洗液里加的渗透压调节剂是甘露醇，然后缓慢转移至一定浓度的蔗糖溶液中，想用密度梯度法把原生质体集中在界面处，但效果不好。有些文献用的是聚蔗糖，请教一下前辈，聚蔗糖效果会比蔗糖好吗？（这么问完全是因为聚蔗糖有点贵。。。）
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1楼 2016-07-12 10:04:25
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kindywind

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 南山五柳生 at 2016-07-12 13:43:06
好吧，可能是我酶解得不太好。再问您一个问题，我准备用2步酶解法：先用果胶酶，过40-100-200目筛，再用纤维素酶、半纤维素酶，过400目筛（约38微米），然后离心纯化，叶肉细胞直径10微米不到。您觉得可以吗~...

应该可以，你可以两种酶一起用，能缩短时间，我觉得两个尺寸的筛可以

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拖延症患者懒癌晚期~
4楼2016-07-12 14:48:49
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kindywind

铁杆木虫 (职业作家)
你过筛以后就没有碎片了，可以直接低速离心到管底，不用梯度密度，直接用洗液离就可以

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拖延症患者懒癌晚期~
2楼2016-07-12 12:08:39
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南山五柳生

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kindywind at 2016-07-12 12:08:39
你过筛以后就没有碎片了，可以直接低速离心到管底，不用梯度密度，直接用洗液离就可以

好吧，可能是我酶解得不太好。再问您一个问题，我准备用2步酶解法：先用果胶酶，过40-100-200目筛，再用纤维素酶、半纤维素酶，过400目筛（约38微米），然后离心纯化，叶肉细胞直径10微米不到。您觉得可以吗~
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3楼2016-07-12 13:43:06
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安生如沫xn

新虫 (初入文坛)
您好，请问你后面有试着用聚蔗糖分离叶肉细胞的原生质体么？

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5楼2019-09-05 01:17:38
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