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南山五柳生

铁虫 (小有名气)

[求助] 聚蔗糖 和 蔗糖 用作密度梯度离心介质时区别大吗

最近做叶肉细胞的原生质体分离,原生质体洗液里加的渗透压调节剂是甘露醇,然后缓慢转移至一定浓度的蔗糖溶液中,想用密度梯度法把原生质体集中在界面处,但效果不好。有些文献用的是聚蔗糖,请教一下前辈,聚蔗糖效果会比蔗糖好吗?(这么问完全是因为聚蔗糖有点贵。。。)
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kindywind

铁杆木虫 (职业作家)

你过筛以后就没有碎片了,可以直接低速离心到管底,不用梯度密度,直接用洗液离就可以

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拖延症患者懒癌晚期~
2楼2016-07-12 12:08:39
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南山五柳生

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kindywind at 2016-07-12 12:08:39
你过筛以后就没有碎片了,可以直接低速离心到管底,不用梯度密度,直接用洗液离就可以

好吧,可能是我酶解得不太好。再问您一个问题,我准备用2步酶解法:先用果胶酶,过40-100-200目筛,再用纤维素酶、半纤维素酶,过400目筛(约38微米),然后离心纯化,叶肉细胞直径10微米不到。您觉得可以吗~
3楼2016-07-12 13:43:06
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kindywind

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 南山五柳生 at 2016-07-12 13:43:06
好吧,可能是我酶解得不太好。再问您一个问题,我准备用2步酶解法:先用果胶酶,过40-100-200目筛,再用纤维素酶、半纤维素酶,过400目筛(约38微米),然后离心纯化,叶肉细胞直径10微米不到。您觉得可以吗~...

应该可以,你可以两种酶一起用,能缩短时间,我觉得两个尺寸的筛可以

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拖延症患者懒癌晚期~
4楼2016-07-12 14:48:49
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安生如沫xn

新虫 (初入文坛)

您好,请问你后面有试着用聚蔗糖分离叶肉细胞的原生质体么?

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5楼2019-09-05 01:17:38
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