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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 平末端大片段克隆的相关问题
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redrover

禁虫 (小有名气)
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1楼 2016-07-10 18:19:52
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maidou0726

新虫 (初入文坛)
楼主，我已经做了近9个月的平末端克隆，各种方法都试了，不行。2000bp的我每次都能成功，只要是平末端就不行，楼主可以加我好友，咱们讨论讨论经验。

发自小木虫Android客户端
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13楼2016-07-15 01:54:24
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redrover

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
2楼2016-07-10 22:50:08
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不爱做实验

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
本身平端连接就不是很容易，建议加大目的片段和载体的量，也适当加大连接酶的量。
个人之前做了几次，要么假阳性，要么只有几个菌斑。一直是比较有难度的实验。
有的时候好像真的靠运气。
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3楼2016-07-11 10:57:43
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
平末端不好做，实在不出来不如添加酶切位点再做，顺利的话一周就出来了
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4楼2016-07-11 14:58:17
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