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PCR引物设计出现问题，无论怎么p都出不来 已有1人参与
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实验室有人溶菌酶的一段基因，在载体pPIC9K上，溶菌酶序列后面加了两段GGGGS连接肽，后面还有一段多肽序列。 现在想要把多肽换成其他的12肽，可是设计引物的时候由于GGGGS（序列GGTGGTGGTGGTTCTGGTGGTGGTGGTTCC）的存在，怎么都p不出 也就是BamHI +人溶菌酶+GGGGSGGGGS+12肽+ECoRI的结构 前面的100个碱基 GGATCCAAACGATGAGATTTCCTTCAATTTTTACTGCAGTTTTATTCGCAGCATCCTCCGCATTAGCTGCTCCAGTCAACACTACAACAGAAGATGAAAC 尾巴的碱基 CGTTCGTCAATACGTCCAAGGTTGTGGTGTTGGTGGTGGTGGTTCTGGTGGTGGTGGTTCCTCTGGTGTTTACAAGGTTGCTTACGATTGGCAACACTAAGAATTC 求大神帮我设计方案了！！ 跪谢！！ |
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木虫 (正式写手)
国家自然科学基金委员会委员长
- 应助: 29 (小学生)
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-11 07:01:48
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-11 07:01:48
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搞这么复杂干嘛，引物设计只要注意酶切位点和保护碱基的问题，连到什么样的载体，信号肽之类另说，只要引物差不多条件，模板上有这段基因pcr就一定p的出来 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-07-10 13:38:19
3楼2016-07-10 16:31:34
4楼2016-07-11 13:47:49
