| 查看: 1262 | 回复: 3 | |||
[求助]
PCR引物设计出现问题，无论怎么p都出不来 已有1人参与
|
|
实验室有人溶菌酶的一段基因，在载体pPIC9K上，溶菌酶序列后面加了两段GGGGS连接肽，后面还有一段多肽序列。 现在想要把多肽换成其他的12肽，可是设计引物的时候由于GGGGS（序列GGTGGTGGTGGTTCTGGTGGTGGTGGTTCC）的存在，怎么都p不出 也就是BamHI +人溶菌酶+GGGGSGGGGS+12肽+ECoRI的结构 前面的100个碱基 GGATCCAAACGATGAGATTTCCTTCAATTTTTACTGCAGTTTTATTCGCAGCATCCTCCGCATTAGCTGCTCCAGTCAACACTACAACAGAAGATGAAAC 尾巴的碱基 CGTTCGTCAATACGTCCAAGGTTGTGGTGTTGGTGGTGGTGGTTCTGGTGGTGGTGGTTCCTCTGGTGTTTACAAGGTTGCTTACGATTGGCAACACTAAGAATTC 求大神帮我设计方案了！！ 跪谢！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有206人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
976592787
木虫 (正式写手)
国家自然科学基金委员会委员长
- 应助: 29 (小学生)
- 金币: 2365.1
- 散金: 999
- 红花: 10
- 帖子: 870
- 在线: 179.8小时
- 虫号: 2823824
- 注册: 2013-11-24
- 性别: GG
- 专业: 抗肿瘤药物药理
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-11 07:01:48
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-11 07:01:48
|
搞这么复杂干嘛，引物设计只要注意酶切位点和保护碱基的问题，连到什么样的载体，信号肽之类另说，只要引物差不多条件，模板上有这段基因pcr就一定p的出来 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-07-10 13:38:19
3楼2016-07-10 16:31:34
4楼2016-07-11 13:47:49