24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1739  |  回复: 5

songyl1414

新虫 (初入文坛)

[求助] 酵母基因删除

最近在做酵母基因片段删除,方法是两步转化,先用URA3,代替要被被删除的部分;SC-URA3平板筛远。再将要删除片段的前后两段基因经搭桥PCR连在一起,用它转化去掉URA3,经5-FOA筛选后,PCR检测,电泳正常情况是出现一条条带,但出现了两条,一条正确,一条表示URA3未被删除。请问有人知道这是怎么回事吗?急求。

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luckydog52

木虫 (著名写手)

pcr检测不应该是四对引物扩增检测吗? 你只用一对?

发自小木虫Android客户端
自信源于一次次成功的积累
2楼2016-07-09 10:33:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

songyl1414

新虫 (初入文坛)

我是用了一对,来检测URA3是否去除。理想情况是去除URA3,条带大小700多一点。但出现两条带。没有做过用四对引物来扩增检测,它的原理是什么呀。。

发自小木虫Android客户端
3楼2016-07-09 12:50:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大摇大摆

铜虫 (小有名气)

你好,想请问你你的5-FOA的培养基是怎么配的呢?最近在做酿酒酵母ura3基因敲除,正常菌种在配制的5-foa的培养基都能生长,感觉有点问题,想请教你一下
我用双手成就你的梦想
4楼2017-06-26 08:31:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
5楼2017-12-27 13:29:59
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

seeeea

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liujianyu at 2017-12-27 13:29:59
请教一下 你的5-FOA后来怎么配的 我现在用水配真的很难溶解啊...

你好 请问 你的5-FOA加入培养基后有调ph吗
6楼2018-01-10 16:11:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 songyl1414 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[基金申请] 面上本子正文33页,违规吗?会被低分嘛? +11 1234567wang 2026-05-17 13/650 2026-05-20 18:55 by tanfancy
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +6 fummck 2026-05-20 6/300 2026-05-20 17:29 by 姜太公烤鱼
[论文投稿] Sci. Bull. 悲剧经验 +6 jyang1999 2026-05-16 7/350 2026-05-20 16:39 by feng6531
[基金申请] 今年审到国自然15份,谈谈感受 +19 国自然国社科中 2026-05-17 20/1000 2026-05-20 14:14 by 仲夏夜的星星
[基金申请] 国自然评分 +3 无名者登山 2026-05-20 4/200 2026-05-20 13:29 by vito刘
[文学芳草园] 献血感触 +6 呀呀好傻 2026-05-19 11/550 2026-05-19 22:26 by 而立得乐
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +3 光伏爱好者 2026-05-17 5/250 2026-05-19 19:13 by 光伏爱好者
[基金申请] 2026山东省优青 +3 luckinging 2026-05-14 4/200 2026-05-19 16:15 by 52wls
[考博] 找博士生导师 +6 小代想上岸 2026-05-15 7/350 2026-05-19 10:22 by free_fisher
[考博] 26/27申博自荐-锂/钠电池方向 5+3 狗头军师. 2026-05-15 4/200 2026-05-19 09:10 by moonboat
[基金申请] 同样的基金本子,换个专家直接从C变A! (金币-10) +3 国自然国社科中 2026-05-19 3/150 2026-05-19 08:50 by Equinoxhua
[基金申请] 别被青基扩招骗了!26年科研内卷才刚刚开始 +3 国自然国社科中 2026-05-14 4/200 2026-05-19 08:48 by archvillain
[考博] 2026博士还有哪些学校有名额 +7 小王求读研 2026-05-15 8/400 2026-05-19 08:27 by zhyzzh
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[基金申请] 国自然上会要求 +5 无名者登山 2026-05-18 9/450 2026-05-18 17:50 by BlakeReary
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
[文学芳草园] 半夜喝咖啡 +3 myrtle 2026-05-15 5/250 2026-05-18 01:03 by 小沈2018
[考博] 光量子物理方向 博士招生 1人(2026.09) +3 sandyworld 2026-05-15 4/200 2026-05-17 14:38 by sandyworld
[硕博家园] 申请博士 +3 呃?呃 2026-05-15 3/150 2026-05-16 11:01 by a4742549
信息提示
请填处理意见