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19921105

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:DNA为什么提不出来?? 已有3人参与

用95%乙醇保存的虫子一年了,DNA提不出来吗?连续3次都没有提出来,有人做过吗?是不是因为时间太久结构已经被破坏了?

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memorize1991

木虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-08 07:48:36
你怎么提取的,CTAB法,还是试剂盒?试剂盒是专门针对这个种属的试剂盒吗?如果放的太久,就用试剂盒吧,你的问题也没描述清楚~你用哪种提取方法?有些可能提取出来后看不出来,你是否PCR扩增后再检测有没有DNA?你DNA是怎么检测有没有的?分光光度计?琼脂糖胶还是其他?

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2楼2016-07-07 21:18:34
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19921105

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by memorize1991 at 2016-07-07 21:18:34
你怎么提取的,CTAB法,还是试剂盒?试剂盒是专门针对这个种属的试剂盒吗?如果放的太久,就用试剂盒吧,你的问题也没描述清楚~你用哪种提取方法?有些可能提取出来后看不出来,你是否PCR扩增后再检测有没有DNA?你 ...

用的试剂盒提取的,琼脂糖验证没有目的条带,在想是操作问题还是试剂盒问题,或者是虫子保存时间太久?正在验证中

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3楼2016-07-08 18:00:35
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于祥勇

木虫 (职业作家)

提取DNA不能太着急,时间放置久的材料多试试几种提取方法,ctab,sds等方法多尝试尝试

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4楼2016-07-09 14:14:01
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maxye89

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

5楼2016-07-15 17:23:25
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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)

核酸是非常稳定的,几千年前的木乃伊全身的蛋白早已被腐蚀殆尽,但核酸还依然保存,应该不是保存太久的原因,你说的没有目的条带是什么意思?是说提出其他条带了还是全是降解的弥带?

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6楼2016-07-15 21:17:43
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元元元儿

新虫 (小有名气)

应该是不会有影响的,改正一下提取条件吧

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7楼2016-08-06 11:37:52
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Jay奏依然

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

推荐karroton试剂盒试试。。。
我在,理想在!
8楼2016-08-08 10:42:25
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel

【答案】应助回帖

我建议你先脱干净乙醇吧,然后采用最传统的方法进行,试剂盒里面的东西很多时候对于你的那个标本是不适用的
奋斗是我们前进的动力!
9楼2016-08-08 16:32:02
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books

木虫 (小有名气)

10楼2016-08-08 20:04:47
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