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小李纸11

银虫 (正式写手)

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专业: 基因表达调控与表观遗传学

[求助] 只导入目的片段的感受态细胞能正常生长及复制基因吗？已有1人参与

将目的片段连接至T载体后导入DH5α感受态，然后长出白斑，挑了几个提了质粒，但是质粒大小有两种情况，一种和目的片段差不多大，一种远大于目的片段，我想知道只导入目的片段的感受态细胞能正常生长及复制基因吗？

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1楼 2016-07-04 14:02:24

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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

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专业: 微生物遗传育种学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

目的片段（一般含抗性基因，不含质粒backbone）本来就可以直接用于转化感受态细胞能，这在大肠杆菌和酵母里已经是一种常用的分子实验手段了。但是这种情况，目的片段只有整合至宿主染色体上才能正常生长及复制基因，并不会游离存在。也就是说是提不出质粒的。
像你试验中遇到的情况应该不属于此类。还是实验本身有问题，分子实验结果有时候很难去彻底的解释清楚。
对了，你做酶切了没有？不酶切的话，什么都说明不了。

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一品黄山

2楼2016-07-05 09:33:08