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小李纸11

银虫 (正式写手)

[求助] 只导入目的片段的感受态细胞能正常生长及复制基因吗? 已有1人参与

将目的片段连接至T载体后导入DH5α感受态,然后长出白斑,挑了几个提了质粒,但是质粒大小有两种情况,一种和目的片段差不多大,一种远大于目的片段,我想知道只导入目的片段的感受态细胞能正常生长及复制基因吗?
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
目的片段(一般含抗性基因,不含质粒backbone)本来就可以直接用于转化感受态细胞能,这在大肠杆菌和酵母里已经是一种常用的分子实验手段了。但是这种情况,目的片段只有整合至宿主染色体上才能正常生长及复制基因,并不会游离存在。也就是说是提不出质粒的。
像你试验中遇到的情况应该不属于此类。还是实验本身有问题,分子实验结果有时候很难去彻底的解释清楚。
对了,你做酶切了没有?不酶切的话,什么都说明不了。
一品黄山
2楼2016-07-05 09:33:08
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