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做菌种培养的请进
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β-内酰胺酶的制备方法: 将产酶菌(什么菌种?哪里可以购买?)在平皿上画出单个菌落,挑取2-3个菌落(什么单位?)接种于25ml营养肉汤(如何配置?)中,37℃恒温摇床培养18h后,取2ml菌液转种于200ml营养肉汤(是否和前述一样?)中,37℃,150r/min恒温摇床培养6h。 上述200ml营养肉汤培养液,6500r/min,4℃离心15min,弃去上清液,沉淀物用0.1MpH7.2磷酸盐缓冲液冲洗2遍,将沉淀物悬浮(如何悬浮?是否加入调节比重的物质?)于适量0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液,在冰浴条件下用MSE超声破碎仪将菌体破碎。破碎后菌液用低温超速离心机离心,21000r/min,4℃,1h。上清液即为β-内酰胺酶提取液(其储存温度、保质时间?)。 方法摘自信阳农校学报的一篇论文:β-内酰胺酶的研究进展 方法是否可行请鉴定一下。请回答一下问题。 如果有更简便的方法,传授一下。 |
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将产酶菌(金黄色葡萄球菌,链球菌)在平皿上画出单个菌落,挑取2-3个菌落(最好只挑一个菌落)接种于25ml营养肉汤(现在都是成品,按照说明书配制;到百度搜索也可以!)中,37℃恒温摇床培养18h后,取2ml菌液转种于200ml营养肉汤(和前述一样)中,37℃,150r/min恒温摇床培养6h。 上述200ml营养肉汤培养液,6500r/min,4℃离心15min,弃去上清液,沉淀物用0.1MpH7.2磷酸盐缓冲液冲洗2遍,将沉淀物悬浮(用吸管或移液枪反复吹吸,不必加入调节比重的物质)于适量0.01M pH7.0磷酸盐缓冲液,在冰浴条件下用MSE超声破碎仪将菌体破碎。破碎后菌液用低温超速离心机离心,21000r/min,4℃,1h。上清液即为β-内酰胺酶提取液(4℃就可以,-20℃保存期更长)。 |

3楼2008-12-10 17:42:55
2楼2008-12-02 09:03:09
fzbxxw
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