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小李纸11

银虫 (正式写手)

[求助] 重组质粒导入受体细胞后提质粒结果是这样的,帮忙分析一下。。。 已有3人参与

如图,我的PCR产物长1574,加A尾,和T载体(长2692)连接,然后导入DH5α,挑了5个白斑,培养以后再提取质粒,跑琼脂糖凝胶电泳得到这样的结果,,,

重组质粒导入受体细胞后提质粒结果是这样的,帮忙分析一下。。。
P1011271.JPG
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小李纸11

银虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 原来,是这样 at 2016-07-04 18:39:31
第3个样品连上了,提的质粒是超螺旋的,所以对比marker分子量会比预期小,你做个酶切然后再跑胶就知道了,其他都是空载体,可以扔了。

嗯嗯,我是用的这个做酶切的。

发自小木虫Android客户端
9楼2016-07-05 10:24:16
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查看全部 13 个回答

小李纸11

银虫 (正式写手)

Marker从上往下数第4,5,6,条分别是3472,2690,1882,1489。。。
2楼2016-07-02 16:42:42
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sayen

银虫 (小有名气)

3楼2016-07-03 00:59:49
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎回帖交流 2016-07-03 08:40:16
小李纸11: 金币+6, ★★★很有帮助 2016-07-04 14:08:31
做质粒酶切了没有?如果不做酶切的话,质粒跑出来的条带可能有多样,即使是同一个质粒,也可能不同。这是由于质粒不同的拓扑结构决定了。建议1)做酶切,这个一般比较可靠;2)做特异性PCR,能扩出目的条带,就证明可能是正确的。
一品黄山
4楼2016-07-03 08:37:51
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