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质粒提取 已有6人参与
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各位大神们，小妹请教一个问题。我从DH5a中提重组质粒pET-32a-目的片段，一直都提不出来呀，用的是天根的小质粒提取试剂盒来做的。请问是什么原因，该怎么办呢？ 发自小木虫IOS客户端 |
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 分子生物 |
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xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-07-02 07:06:59
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xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎发帖交流 2016-07-02 07:06:59
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你的试剂盒有没有问题啊？可以做个对照，换种质粒提一下。还有就是，你的DH5α确定含有质粒吗？会不会是假阳性？再者就是你确定你操作没问题吗？很多小细节都会影响提取效率。还有就是你怎么确定你的质粒没有提取出来的？是测浓度还是跑胶验证？ 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-07-01 19:48:46
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-03 22:29:43
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-03 22:29:43
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重组质粒第一步需要鉴定出正确克隆，然后过夜培养提质粒，你提质粒的菌液OD值应该为2——4。另外你现在选的感受态转化效率没有全是金的T1转化效率高，不行可以换它 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2016-07-02 07:44:38
4楼2016-07-02 17:30:35
5楼2016-07-02 17:31:30
6楼2016-07-02 18:07:24
7楼2016-07-02 18:08:12
8楼2016-07-02 18:09:17
9楼2016-07-03 22:05:21
10楼2016-07-04 13:36:44