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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒提取
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zxd95

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
多集些菌，然后再提，就是接种后，摇菌一定要到12小时，不然浓度不够

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追梦的人
11楼2016-07-05 10:28:25
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wanglei512

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
提质粒前要先做菌落PCR或菌液PCR，正确以后再提质粒，提完以后再做酶切鉴定然后送测序。同时你的片段只有110bp应该特别好连，检查你的酶切位点是否正确，载体有没有问题。
提质粒时一般如果在加入solutionII的时候不拉丝就不用往下提了
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12楼2016-07-05 14:31:48
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wanglei512

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by yml11 at 2016-07-03 22:05:21
送公司测序了，但是说的是模版浓度太低，测不出来
...

pet-32确实是低拷贝的，所以浓度低一点很正常，但是也没有低到测序测不出来，实在不行你就多提几管，最后一步过同一个柱子来提高浓度，个人认为问题出在你前面连接、转化等过程中
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13楼2016-07-05 14:36:04
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star013

新虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们可以提供该技术服务

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14楼2016-07-06 08:14:49
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yml11

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by wanglei512 at 2016-07-05 14:31:48
提质粒前要先做菌落PCR或菌液PCR，正确以后再提质粒，提完以后再做酶切鉴定然后送测序。同时你的片段只有110bp应该特别好连，检查你的酶切位点是否正确，载体有没有问题。
提质粒时一般如果在加入solutionII的时候 ...

请问不拉丝是什么意思呀？

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15楼2016-11-28 11:34:28
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