应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 关于移码突变的解决办法
51/1返回列表
查看: 8390  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

gstracy

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于移码突变的解决办法 已有4人参与

插入目的基因到表达载体时，只考虑到碱基是3的倍数就不会产生移码突变，克隆完成发现GFP不表达，回过头才发现还是移码突变了。
请问在现有的突变基础上，能否在目的基因和GFP之间插入linker（5个甘氨酸再加一个碱基）来解决移码突变的问题？
很着急，涉及到毕业

关于移码突变的解决办法
IMG_6723.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-06-27 15:07:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

再见江湖

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 再见江湖 at 2016-06-30 21:58:25
用snapgene测吧，很方便。

把原载体序列用snapgene打开，再把你的序列打开，两端加引物生成带酶切位点的片段，按软件进行电子酶切连入载体，是否移码一目了然。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2016-06-30 22:10:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

viki_MDK

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以的，也可以设计引物，重新PCR，酶切酶连就可以了
赞一下 回复此楼
2楼2016-06-27 15:42:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gstracy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by viki_MDK at 2016-06-27 15:42:36
可以的，也可以设计引物，重新PCR，酶切酶连就可以了

我想把目的基因切下来，设计下游引物时，在酶切位点前加5个甘氨酸和1个碱基，我担心加的这1个碱基会影响融合蛋白的表达
赞一下 回复此楼
3楼2016-06-27 16:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

viki_MDK

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xn8008: 应助指数+1 2016-06-30 22:31:24
引用回帖:
3楼: Originally posted by gstracy at 2016-06-27 16:41:39
我想把目的基因切下来，设计下游引物时，在酶切位点前加5个甘氨酸和1个碱基，我担心加的这1个碱基会影响融合蛋白的表达...

不需要切下来，，直接拿你的质粒，设计好引物，PCR后就是你要的产物，再链接就可以了
赞一下 回复此楼
4楼2016-06-27 17:10:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[职场人生] 40+中年人失业后，还能找到好工作吗？ +11 xqy2009 2026-10-13 13/650 2026-10-15 21:32 by bear2007
[有机交流] 用NBS溴化时溶剂除了CCl4外还有什么 +3 18834002860 2026-10-12 6/300 2026-10-15 14:30 by 长沙摩尔信息科�
[基金申请] 申请科研项目纯靠实力能成功吗？ 200+7 David1982 2026-10-13 11/550 2026-10-15 10:30 by zyqchem
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +11 Isak0320 2026-10-12 15/750 2026-10-14 21:55 by 猫鱼不是鱼
[论文投稿] 二审4个多月了还是Awaiting Reviewer Scores 10+3 纳斯达克ML 2026-10-11 4/200 2026-10-14 17:30 by babero
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +8 wangyl_123 2026-10-10 13/650 2026-10-14 15:12 by zuesli
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +4 好运来～9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭