应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 构建好的载体，滴在滤纸上，四度能保存多久啊？
121/2返回列表12下一页
查看: 3633  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

panyax

新虫 (初入文坛)

[求助] 构建好的载体，滴在滤纸上，四度能保存多久啊？ 已有1人参与

老师去年八月份从国外带回来的质粒，质粒是滴在滤纸上保存的，拿回来之后一直放在四度冰箱里。最近老师给我，要我把质粒转化出来，或者PCR把目的片段扩增出来。

但是转化之后，板子上不长菌。

pcr电泳得到的条带很暗。怎么都扩增不亮。是不是这个质粒已经不能用了啊？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-06-27 10:50:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
1) 剪碎滴液体区域，扔到ep管里，溶解在TE or ddH2O里，静置一段时间
2) 离心取出所有上清
3) *optional 浓缩液体
4) 转化高效率感受态，保证10^8的效率
赞一下(3人) 回复此楼
Let God do with it as He wills
7楼2016-06-28 16:59:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

panyax

新虫 (初入文坛)
不要沉，求助啊
回复此楼
2楼2016-06-27 11:30:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

慢慢的路过

铜虫 (初入文坛)
这个不应该拿回来就处理的吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-06-27 12:18:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panyax

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 慢慢的路过 at 2016-06-27 12:18:55
这个不应该拿回来就处理的吗？

老师开始给另一个同学在做，他做不出来，最近才给我的。。。
赞一下 回复此楼
4楼2016-06-27 17:03:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1205vivia

银虫 (小有名气)
换个菌株试试

发自小木虫Android客户端
回复此楼
5楼2016-06-27 23:59:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panyax

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 1205vivia at 2016-06-27 23:59:36
换个菌株试试

我的载体是常用的1300s，有什么好的建议吗？目前用过DH5α和gold
赞一下 回复此楼
6楼2016-06-28 16:03:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

werq63

金虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by atlanticwi at 2016-06-28 16:59:08
1) 剪碎滴液体区域，扔到ep管里，溶解在TE or ddH2O里，静置一段时间
2) 离心取出所有上清
3) *optional 浓缩液体
4) 转化高效率感受态，保证10^8的效率

加入TE之后搅碎，离心，取上清转化，你这个可以取10ul，确定好抗性

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-06-28 23:20:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sayen

银虫 (小有名气)
估计悬，4度放了快一年，还是滤纸上

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2016-06-28 23:26:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panyax

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by atlanticwi at 2016-06-28 16:59:08
1) 剪碎滴液体区域，扔到ep管里，溶解在TE or ddH2O里，静置一段时间
2) 离心取出所有上清
3) *optional 浓缩液体
4) 转化高效率感受态，保证10^8的效率

用DH5α转化了，也尝试过用电转化，但是碰到了板子只长一个菌，然后基本都能摇出来，但就是抽不出质粒，或者说浓度很低。。。。
赞一下 回复此楼
10楼2016-06-29 09:03:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 panyax 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:26 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-15 07:38 by C79jjtjAKjEn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:26 by C79jjtjAKjEn
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-15 07:14 by C79jjtjAKjEn
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:14 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-15 05:49 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 05:34 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-15 05:00 by mibUvS8DDCwf
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 01:21 by mibUvS8DDCwf
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:45 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:13 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭