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malstose金虫 (正式写手)
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请问，琼脂糖变性胶为何跑着就撕裂了？ 已有1人参与
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大家好，请问一个问题，我做的RNA变性胶（琼脂糖、MOPS及Formaldehyde的配方），电泳液为1×MOPS，电压设置为100V/3hr。 昨天只跑了2hr就发现蓝色loading buffer很淡，在凝胶的下部分裂了，上半部分正常； 今天同事又试了一次，这次跑了3hr，还是对着正极的部分撕裂变形了，而且好好的一块胶居然分两层了……，而上半部分没变化。这两次的缓冲液都是温热的，我觉得不应该是缓冲液过热的问题，我之前遇到过缓冲液烫手的情况，那样胶会部分溶解的，不会造成这种局部畸变的情况。 第一次遇见这种情况，希望有同样经历的虫友可以交流经验，在此先谢过！   1.jpg  2.jpg  3.jpg  4.jpg@biostar2009@飞约疯人院 |
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【答案】应助回帖
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我们之前使用短的电泳槽时也出现这样情况，适当降低电压试试吧。 发自小木虫Android客户端 |
malstose
2楼2016-06-23 19:10:25
malstose
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根据以往经验，主要原因可能是倒胶的时候MOPS 甲醛和琼脂糖胶混得不够匀，（温度和比例都要控制得当）避免有小的气泡。跑胶的时候，电压高了产热会严重，造成甲醛挥发使胶体变脆，容易变形甚至熔化。 发自小木虫Android客户端 |
10楼2016-06-28 07:33:36