应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 关于DNA连接载体与目的片段的比例是1:3到1:10的问题
231/3返回列表123下一页
查看: 19648  |  回复: 22
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

王平阳

金虫 (正式写手)

[求助] 关于DNA连接载体与目的片段的比例是1:3到1:10的问题 已有2人参与

在进行DNA连接的时候，常说载体与目的片段的比例是1:3到1:10，我想问的是这里所说的比例是质量比还是物质的量比？
例如：我有一组模板。经测定质量浓度大约1100ng/uL，换算成物质的量浓度大约0.2uM，目的片段物质的量浓度是10uM，换算成质量浓度大约是160ng/uL，请问这个要怎么配置比例啊？
求教各位大神！ @youlinglyw
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
没有做不到，只有想不到！
1楼 2016-06-18 09:21:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张小蛋

新虫 (小有名气)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-06-18 17:04:23
说的是体积比，看你自己的条带亮度了，还有胶回收定容情况，一般载体要浓度低一点，我偏向于10:1，因为载体不管浓度多大，都会疯连，建议可以做一个梯度，比如1:1、2:1、3:1、10:1，然后混合到一管，我一般不会去测浓度，意义不大，祝好运~

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-06-18 10:10:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

virus510

禁虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-06-18 17:04:40
本帖内容被屏蔽
3楼2016-06-18 11:45:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

娟恋幸福

新虫 (小有名气)
说的是体积比，我一般都是跑胶看一下载体与片段的亮度，根据亮度按比例加

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-06-18 22:04:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王平阳

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 张小蛋 at 2016-06-18 10:10:19
说的是体积比，看你自己的条带亮度了，还有胶回收定容情况，一般载体要浓度低一点，我偏向于10:1，因为载体不管浓度多大，都会疯连，建议可以做一个梯度，比如1:1、2:1、3:1、10:1，然后混合到一管，我一般不会去测 ...

首先写你的解答，不过如果不管浓度只是按体积比加，那这个体积比不是没有意义了吗？如果是按电泳亮度，那就是和质量比一样啦？
赞一下 回复此楼
没有做不到，只有想不到！
5楼2016-06-18 22:35:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王平阳

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by virus510 at 2016-06-18 11:45:01
物质的量之比，一般是载体少一些，目的片段多一些，这样连接成功率高，不至于挑菌的时候成功率高。

我个人觉得也应该是物质的量浓度，可是商业化的载体如pMD-18T载体标注的却是50ng/uL，意思就是按质量比了，所以有点蒙了
赞一下 回复此楼
没有做不到，只有想不到！
6楼2016-06-18 22:37:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王平阳

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 娟恋幸福 at 2016-06-18 22:04:39
说的是体积比，我一般都是跑胶看一下载体与片段的亮度，根据亮度按比例加

电泳亮度比，那就是和质量比一样了？
赞一下 回复此楼
没有做不到，只有想不到！
7楼2016-06-18 22:38:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

576789501

新虫 (小有名气)
物质的量比。

发自小木虫Android客户端
回复此楼
8楼2016-06-19 00:04:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

masterboyama

铁虫 (著名写手)
保证胶回收的时候，条带要足够的亮，可以做个浓缩，连接的时候多用些或全用上，连接成功后，留着也没用。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2016-06-19 06:41:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

virus510

禁虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
王平阳: 金币+2, ★有帮助, 谢谢你的回答 2016-06-19 23:10:05
本帖内容被屏蔽
10楼2016-06-19 09:13:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 王平阳 的主题更新
231/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +7 布布和一二 2026-08-08 13/650 2026-08-09 10:37 by 布布和一二
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:22 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 5/250 2026-08-08 17:02 by oEVWOejN9taj
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:22 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:19 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:02 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:47 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:22 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:01 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +11 且听虎啸 2026-08-07 14/700 2026-08-08 12:50 by 布布和一二
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭