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[交流]
trizol法采用纯化柱提取细胞中RNA的一些问题，
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我们做RNA提取有一段时间，之前是选用试剂盒的方法提取RNA，现在我想用TRIZOL法尝试一下，步骤如下 加1ml trizol裂解细胞5min，转移到2ml离心管中，加200μl 氯仿震摇30s，4℃静置5min，12000rpm离心10min 取上清液等体积加入异丙醇到一新的2ml离心管中，室温静置10min（还有说-20℃放置2h），下一步我选择的是纯化柱过柱离心12000rpm，2min 加入700μl 75%异丙醇 离心12000rpm，2min 加入40μl RNase Free Water之后开始测RNA浓度 想请教一下这个过程RNA会降解吗？需要注意哪些问题？之前用试剂盒的方法加入巯基乙醇防止RNA降解，现在可以加入吗？在哪一步加合适 |
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19楼2016-06-14 10:22:25
21楼2016-06-14 14:21:03
23楼2016-06-15 10:54:33
24楼2016-06-15 15:37:48
25楼2016-06-15 22:33:33
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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实验过程中带一次性口罩，手套，帽子进行实验，手是RNase的主要来源，实验过程勤换手套。实验过程保持在低温条件下进行，操作迅速，及时更换枪头。这些就能尽量减少RNase对RNA的降解 发自小木虫Android客户端 |
26楼2016-06-16 00:46:13
27楼2016-06-16 13:53:05
28楼2018-11-28 14:07:13
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hydzp2楼
2016-06-13 16:28
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fdzjm3楼
2016-06-13 16:35
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psylhh4楼
2016-06-13 16:36
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skyish6楼
2016-06-13 16:46
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假大空9楼
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zhaoyan197810楼
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shenrenren11楼
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xhmaohan12楼
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caledonian13楼
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2016-06-15 00:03
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