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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » trizol法采用纯化柱提取细胞中RNA的一些问题，
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jhyswqs

木虫 (正式写手)

[交流] trizol法采用纯化柱提取细胞中RNA的一些问题，

我们做RNA提取有一段时间，之前是选用试剂盒的方法提取RNA，现在我想用TRIZOL法尝试一下，步骤如下

加1ml trizol裂解细胞5min，转移到2ml离心管中，加200μl 氯仿震摇30s，4℃静置5min，12000rpm离心10min

取上清液等体积加入异丙醇到一新的2ml离心管中，室温静置10min（还有说-20℃放置2h），下一步我选择的是纯化柱过柱离心12000rpm，2min

加入700μl 75%异丙醇 离心12000rpm，2min

加入40μl RNase Free Water之后开始测RNA浓度

想请教一下这个过程RNA会降解吗？需要注意哪些问题？之前用试剂盒的方法加入巯基乙醇防止RNA降解，现在可以加入吗？在哪一步加合适
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1楼2016-06-13 16:03:02
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们实验室一直使用的是离心柱法提取细胞RNA，使用的是biog的一款，我看提取效果还是不错的额，同做实验室的小伙伴，可以一起交流提取的方法。
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28楼2018-11-28 14:07:13
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