应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » trizol法采用纯化柱提取细胞中RNA的一些问题，
31/1返回列表
查看: 2461  |  回复: 27
查看全部回帖@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

jhyswqs

木虫 (正式写手)

[交流] trizol法采用纯化柱提取细胞中RNA的一些问题，

我们做RNA提取有一段时间，之前是选用试剂盒的方法提取RNA，现在我想用TRIZOL法尝试一下，步骤如下

加1ml trizol裂解细胞5min，转移到2ml离心管中，加200μl 氯仿震摇30s，4℃静置5min，12000rpm离心10min

取上清液等体积加入异丙醇到一新的2ml离心管中，室温静置10min（还有说-20℃放置2h），下一步我选择的是纯化柱过柱离心12000rpm，2min

加入700μl 75%异丙醇 离心12000rpm，2min

加入40μl RNase Free Water之后开始测RNA浓度

想请教一下这个过程RNA会降解吗？需要注意哪些问题？之前用试剂盒的方法加入巯基乙醇防止RNA降解，现在可以加入吗？在哪一步加合适
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2016-06-13 16:03:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

moxiuyao

新虫 (初入文坛)
★
jhyswqs(金币+1): 谢谢参与
没做过这种

发自小木虫Android客户端
回复此楼
21楼2016-06-14 14:21:03
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

moxiuyao

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们提取的是真菌的dsRNA

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
24楼2016-06-15 15:37:48
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jhyswqs 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭