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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR为阳，双酶切鉴定无目的条带！！！！
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csadxm521

禁虫 (小有名气)
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1楼 2016-06-13 15:07:51
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苏莫离

新虫 (初入文坛)
建议查看载体图谱，确认酶没有用错。另外看看酶的用量或者质粒的用量有没有问题

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4楼2016-06-13 16:01:08
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小周

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 支持积极回帖 2016-06-13 18:37:05
认为你的PCR没问题，就挑两三个直接测序去。别纠结
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2016-06-13 15:17:17
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小周

铁杆木虫 (著名写手)
Marker 不一定准。
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3楼2016-06-13 15:18:33
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 应助指数+1, 支持积极回帖 2016-06-13 18:37:21
一方面你可以跑一个未酶切的质粒在旁边作为对照，看看你所谓的两条带是不是没有酶切开的质粒。另外可以尝试用特异性引物对提取的质粒进行pcr验证，同时拿pet空载做阴性对照，可以扩增你目的片段的模板作为阳性对照，这样来验证也可，祝好！

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赞一下(2人) 回复此楼
天空才是极限，我有信心飞的更高！
5楼2016-06-13 18:33:42
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查看全部 15 个回答
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