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didibisheng
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融合基因插入到载体里如何判断正反向 已有5人参与
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| 有一段通过重叠PCR得到的融合基因片段插入到一个载体里，分析只能做单酶切（用Xcm1），连接后做菌落PCR，采用什么方法可以判断该融合基因插入的正反向呢？有在网上查到菌P的引物可以用载体的正向引物和融合基因的正向引物，得到的是反向插入；载体的正向引物和融合基因的反向引物，得到的是正向插入。按照这个说法，送测得到的结果却不对，求各位大神相助！ |
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kangaroo0513
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4楼2016-06-12 21:51:33
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kaobo2012
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载体序列未知吗？如果有载体序列就在载体上和目的基因设计引物，P出来后直接测序。如果P不出来，说明已经反了，前提是载体引物要特异。 发自小木虫IOS客户端 |
7楼2016-06-13 13:00:22
didibisheng 
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9楼2016-06-13 20:05:43
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10楼2016-06-13 20:07:13