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lnwtx

捐助贵宾 (正式写手)

[求助] 转基因植物western鉴定问题已有2人参与

请假各位,如题,载体测序等都没有问题,转化烟草后也有抗性基因的表达,转基因苗子基因组RCR鉴定目的基因也都有目的条带,但是western却一直做不出来。western检测的是HA抗体,在载体构建的时候在目的基因的后面(3端)加的HA序列,但是western一直检测不到目的条带,不知是基因没有表达呢,还是其他的原因?急求各种可能的原因,谢谢了!!
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为了IF,努力向前冲!哈哈哈哈!
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lnwtx

捐助贵宾 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zmj521good at 2016-06-07 08:47:09
你PCR检测的时候有没有用带HA序列的引物呢?阳性对照能做出来吗?

PCR用的是基因的forward和带HA的reverse引物,能扩出来目的条带
为了IF,努力向前冲!哈哈哈哈!
3楼2016-06-07 11:27:15
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zmj521good

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你PCR检测的时候有没有用带HA序列的引物呢?阳性对照能做出来吗?
认真是一种习惯
2楼2016-06-07 08:47:09
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

读码框是否正确?是否有终止密码子?
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
4楼2016-06-10 23:44:54
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yuxiangdan

木虫 (正式写手)

将整个基因Pcr出来去测序

发自小木虫Android客户端
成功者永不放弃,放弃者永不成功。
5楼2016-06-11 00:19:57
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