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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 转基因植物western鉴定问题
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lnwtx

捐助贵宾 (正式写手)

[求助] 转基因植物western鉴定问题 已有2人参与

请假各位，如题，载体测序等都没有问题，转化烟草后也有抗性基因的表达，转基因苗子基因组RCR鉴定目的基因也都有目的条带，但是western却一直做不出来。western检测的是HA抗体，在载体构建的时候在目的基因的后面（3端）加的HA序列，但是western一直检测不到目的条带，不知是基因没有表达呢，还是其他的原因？急求各种可能的原因，谢谢了！！
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为了IF，努力向前冲！哈哈哈哈！
1楼 2016-06-07 06:35:26
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zmj521good

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你PCR检测的时候有没有用带HA序列的引物呢？阳性对照能做出来吗？
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认真是一种习惯
2楼2016-06-07 08:47:09
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lnwtx

捐助贵宾 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zmj521good at 2016-06-07 08:47:09
你PCR检测的时候有没有用带HA序列的引物呢？阳性对照能做出来吗？

PCR用的是基因的forward和带HA的reverse引物，能扩出来目的条带
赞一下 回复此楼
为了IF，努力向前冲！哈哈哈哈！
3楼2016-06-07 11:27:15
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

读码框是否正确？是否有终止密码子？
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
4楼2016-06-10 23:44:54
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yuxiangdan

木虫 (正式写手)
将整个基因Pcr出来去测序

发自小木虫Android客户端
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成功者永不放弃，放弃者永不成功。
5楼2016-06-11 00:19:57
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zxhhyb

新虫 (初入文坛)
你好
请问这个问题你后来解决了吗？
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6楼2018-11-13 08:31:40
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