| 查看: 1310 | 回复: 4 | |||
zy晨曦新虫 (小有名气)
|
[求助]
上样量对树脂纯化蛋白的影响 已有2人参与
|
| 首次使用弱阴离子交换树脂纯化蛋白，第一次上柱70%的吸附量后洗脱，低浓度盐可以洗脱出来蛋白，第二次上样量减少到50%左右上柱后洗脱，增加盐浓度才能洗脱蛋白，这是为何。第一次上样前树脂再生是利用1M氯化钠，第二次上样前再生是利用碱-盐再生。并且有个问题，弱阴离子交换树脂的Ph如何调整到合适的ph，现在我都是倒出来调好ph然后装柱，有个朋友说不用调整ph。 |
回复此楼» 猜你喜欢
Journal of Mechanical Science and Technology
已经有5人回复
-
085600，材料与化工321分调剂
已经有4人回复
-
0703化学一志愿南京师范大学303求调剂
已经有3人回复
-
材料与化工（0856）304求B区调剂
已经有3人回复
-
292求调剂
已经有4人回复
-
一志愿吉大071010，316分求调剂
已经有3人回复
-
0703化学338求调剂！
已经有7人回复
-
求调剂推荐 材料 304
已经有7人回复
-
324求调剂
已经有5人回复
-
化学308分求调剂
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- DNA凝胶回收方法及常见问题
已经有1人回复
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
- 求助翻译个人简历，药学专业或分析专业同学帮帮忙
已经有0人回复
- 【分享】蛋白质纯化个人总结2
已经有38人回复
- 【资源】液相色谱柱原理
已经有14人回复
hc-material
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +702 - BioEPI: 1
- 应助: 517 (博士)
- 金币: 462.9
- 散金: 18028
- 红花: 313
- 帖子: 3594
- 在线: 518.8小时
- 虫号: 4027804
- 注册: 2015-08-18
- 性别: GG
- 专业: 核技术及其应用
- 管辖: 生物科学
2楼2016-06-07 10:42:21
zy晨曦
新虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2258.4
- 散金: 10
- 红花: 1
- 帖子: 205
- 在线: 77.5小时
- 虫号: 1755080
- 注册: 2012-04-14
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传育种学
|
谢谢您的回复，首先ph问题是因为树脂在洗脱过程中或是放置一天后流出液的ph升高，由原先的7.5上升至8.0，所以再次使用时我都会将ph调到7.5.利用0.025的磷酸盐缓冲液要冲洗很长时间，所以就将树脂倒出调ph。 上样量是随意改变的，上样量是树脂最大吸附量的70%和50%，因为第一次使用最大吸附量的70%上样，出现了0.05M的氯化钠洗脱出目的蛋白（以前从没有洗脱出来，估计和上样量或是树脂使用次数过多导致某些目的蛋白吸附力弱有关），0.2M也能洗脱。所以降低上样量为最大吸附的50%。但是0.4M的氯化钠（以前是0.2M氯化钠）才能洗脱出目的蛋白。这两次的蛋白纯化实验和以前的都有不同之处。 |
3楼2016-06-11 20:32:06
walking dead
金虫 (小有名气)
填料制备和蛋白纯化专家
- 应助: 40 (小学生)
- 贵宾: 0.001
- 金币: 1354.8
- 散金: 59
- 红花: 17
- 帖子: 287
- 在线: 56.5小时
- 虫号: 4175016
- 注册: 2015-10-26
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2016-06-15 17:12:54
zy晨曦
新虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2258.4
- 散金: 10
- 红花: 1
- 帖子: 205
- 在线: 77.5小时
- 虫号: 1755080
- 注册: 2012-04-14
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传育种学
5楼2016-06-17 19:30:07
20