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xqiongwei铁虫 (小有名气)
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大引物PCR建立随机突变库 已有3人参与
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小妹最近在建立随机突变库，先是易错PCR，得到300bp左右的随机突变混合物，切胶纯化后将此混合物作为大引物，运用MEGAWHOP的方法进行全质粒PCR。然而问题来了，点样孔处很亮，其他地方看不到特异性的条带，然而，用未突变的片段作为引物是可以做出来的，已上图。我试过56度、68度、72度退火温度，都不行，快崩溃了，求大师指导一二。感激不尽。 图片1.png |
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xqiongwei
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