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凯伦爱佳佳
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蛋白质纯化
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亲们,有木有做过蛋白质纯化的呀。我包涵体用曲拉通、脲变性、透析过之后,总有白色物质析出,有木有影响啊?
我的透析袋是14000的,目的蛋白50000的。
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1楼
2016-06-02 14:09:35
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5楼
:
Originally posted by
super_mm
at 2016-06-03 10:46:06
摸索合适的复性条件,稀释复性,柱上复性,你可以百度查查,另外复性溶液的pH、离子强度、表面活性剂都是可以摸索的,这工作量可不小。
你可以先试试稀释复性,把待复性的溶液放入透析袋里,把透析袋直接放入到100 ...
我就是把待复性的溶液倒到透析袋,直接放入50倍体积的复性透析液里面,16h换新的,然后就有很多的析出物,跑胶证明是蛋白
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7楼
2016-06-03 13:07:51
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super_mm
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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你是包涵体复性吗?透析去除变性剂吗?白色物质应该是未复性成功的蛋白吧,肯定有影响,析出越少越好啊,把复性后的上清测蛋白浓度和SDS-PAGE,看复性率多少
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2楼
2016-06-02 14:58:23
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2楼
:
Originally posted by
super_mm
at 2016-06-02 14:58:23
你是包涵体复性吗?透析去除变性剂吗?白色物质应该是未复性成功的蛋白吧,肯定有影响,析出越少越好啊,把复性后的上清测蛋白浓度和SDS-PAGE,看复性率多少
好的,我试试
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3楼
2016-06-02 21:21:14
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2楼
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Originally posted by
super_mm
at 2016-06-02 14:58:23
你是包涵体复性吗?透析去除变性剂吗?白色物质应该是未复性成功的蛋白吧,肯定有影响,析出越少越好啊,把复性后的上清测蛋白浓度和SDS-PAGE,看复性率多少
是包涵体复性,是为了去除变性剂,我的析出来好多啊。复性率很低怎么办?
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4楼
2016-06-03 10:30:31
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