应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于重组DNA转化宿主细胞（大肠杆菌DH5α）后阳性克隆的筛选
71/1返回列表
查看: 906  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小李纸11

银虫 (正式写手)

[求助] 关于重组DNA转化宿主细胞（大肠杆菌DH5α）后阳性克隆的筛选 已有4人参与

求助，将目的片段和载体（酶切并纯化后的）进行连接反应，然后转化大肠杆菌感受态细胞，如果连接不成功，那单独的目的片段或单独的载体片段能导入到感受态细胞中吗？如果能导入的话，导入后的宿主菌能正常生长吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2016-06-01 21:44:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yesucao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。myprayer祝您科研顺利，文章多多。 2016-06-02 21:56:15
小李纸11: 金币+6, ★★★很有帮助 2016-07-04 14:14:35
无论是化转还是电转，单独的目的片段或单独的载体片段都能导入到感受态细胞中，需要查看你用的是单酶切还是双酶切了。若双酶切，单独的片段无法复制，所以在宿主菌中无法生长；若是单酶切，且未去磷酸化，载体会出现自连，在宿主菌中出现空载的情况。
赞一下 回复此楼
2楼2016-06-01 22:39:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

易水秋寒

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。myprayer祝您科研顺利，文章多多。 2016-06-02 21:56:28
可使用蓝白菌筛选，蓝菌即为空载体自连
赞一下 回复此楼
3楼2016-06-02 08:54:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

super_mm

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香，谢谢你的理解与支持。myprayer祝您科研顺利，文章多多。 2016-06-02 21:56:37
小李纸11: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-07-04 14:14:47
都能导入，只有连接成功的和空载体自连的能长，所以需要蓝白斑筛选，不行的话就提质粒筛选
赞一下 回复此楼
4楼2016-06-02 15:12:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vjebejw570
祝福
5楼2016-06-02 16:04:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brown-eyes

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小李纸11: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-07-04 14:14:59
都能导入，但是因为片段没有抗性，无法在抗性板上生长，只有自连的空载体能够生长成克隆。
赞一下 回复此楼
6楼2016-06-03 16:06:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

s4f5h7

新虫 (小有名气)
加油加油！
回复此楼
7楼2016-06-03 16:39:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小李纸11 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料化工调剂 +10 今夏不夏 2026-03-01 11/550 2026-03-01 19:49 by 无懈可击111
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 材料学硕318求调剂 +9 February_Feb 2026-03-01 11/550 2026-03-01 19:47 by 无懈可击111
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:11 by 海嵙Y
[考研] 0856调剂 +4 刘梦微 2026-02-28 4/200 2026-03-01 15:35 by 吸一口猫气
[考研] 303求调剂 +4 今夏不夏 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:46 by 嘟嘟小浣熊
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 10/500 2026-03-01 10:02 by 科研狗111
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭