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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 这个图对么？？
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wy604987664

新虫 (小有名气)

[求助] 这个图对么？？ 已有2人参与

提质粒pcr，质粒稀释10倍，左边点的pcr产物，右边是原液质粒，这个图对么？片段大小，maker左右为1450左右右边为987，有人给我说质粒应该是3条带，所以我不确定

这个图对么？？


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1楼 2016-05-31 15:36:50
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Bioexperixgs

新虫 (正式写手)
质粒理论上是有三条带，但实际上条带数和提取试剂和方法有很大的关系，手工提取可能会出现几条条带，试剂盒一般只有一条。保险的方法是做双酶切，然后与完整质粒、空质粒双酶切和目的片段作为对照一起跑胶。

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9楼2016-06-01 22:59:10
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒DNA和PCR原液对比？PCR扩增的是什么？质粒的大小应该是你PCR长度加上载体长度。原则上来说，你可能会跑出三条带，超螺旋、线性和环状。但实际中一般不会出现三条带。
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2楼2016-05-31 22:00:07
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

最保险的，是拿质粒上的探针和你片段的探针，扩增。鉴定。
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3楼2016-05-31 22:00:56
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wy604987664

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 晞朔 at 2016-05-31 22:00:56
最保险的，是拿质粒上的探针和你片段的探针，扩增。鉴定。

质粒原液跟稀释质粒pcr产物，pcr时用的引物是我的特异引物，有人给我说3条带我就只有2条，所以不确定

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4楼2016-05-31 23:59:54
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