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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » EDC，HOBT使蛋白上结合羧基药物的问题
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土鳖虫的飞翔

新虫 (初入文坛)

[交流] EDC，HOBT使蛋白上结合羧基药物的问题

本人做的过程是先用少量有机溶剂溶解羧基药物、EDC、HOBT,活化半小时后再加入到溶有蛋白的PB缓冲液里，0℃反应24h。
主要问题是羧基药物不溶于水，即使活化后加入PB缓冲液里也会即刻出现沉淀，呈牛奶状浑浊液，各位大神有什么好的方法吗？
反应过程还有其他需要注意的问题吗？跪谢~
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1楼 2016-05-30 15:55:38
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foxs2

木虫 (文坛精英)
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7楼2016-05-30 16:55:14
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y125077299

禁虫 (职业作家)
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9楼2016-05-30 17:20:48
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y125077299

禁虫 (职业作家)
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10楼2016-05-30 17:21:50
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125077299

禁虫 (职业作家)
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13楼2016-05-30 18:37:29
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cgandy

铜虫 (文坛精英)
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17楼2016-05-30 19:48:12
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1396522659

银虫 (小有名气)
★
土鳖虫的飞翔(金币+1): 谢谢参与
用Dmso或dmf溶解药物

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24楼2016-05-30 21:59:31
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1396522659

银虫 (小有名气)
是有机溶剂和pb的比比例为2：1

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25楼2016-05-30 22:00:55
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1396522659

银虫 (小有名气)
不好意思，说的有问题，增加溶解的有机溶剂用量，最好用DMSO或DMF溶解药物，用PB溶解蛋白质，使有机溶剂与PB的比例为2：1，再试试

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26楼2016-05-30 22:04:31
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土鳖虫的飞翔

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
26楼: Originally posted by 1396522659 at 2016-05-30 22:04:31
不好意思，说的有问题，增加溶解的有机溶剂用量，最好用DMSO或DMF溶解药物，用PB溶解蛋白质，使有机溶剂与PB的比例为2：1，再试试

嗯，谢谢回答。但是增加有机溶剂的比例会使蛋白析出来，我的蛋白是一种小分子量的酶

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33楼2016-05-31 00:24:05
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olivya

铁虫 (小有名气)
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请问楼主是如何纯化的呢?
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34楼2016-07-18 14:08:06
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匿名

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35楼2016-07-20 02:20:18
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shenrenren2楼
2016-05-30 16:18   回复  
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star_zhang3楼
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假大空4楼
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hydzp6楼
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tzynew8楼
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baiyang31311楼
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tan91414楼
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jiechen15楼
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liucheng88316楼
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sz_kebaoyuan18楼
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chentao19楼
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jixiangbao20楼
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miaojiabing21楼
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天涯201222楼
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yangdw12345827楼
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yangdw12345630楼
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Anita_123431楼
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Anita_12332楼
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