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EDC,HOBT使蛋白上结合羧基药物的问题
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[交流]
EDC,HOBT使蛋白上结合羧基药物的问题
本人做的过程是先用少量有机溶剂溶解羧基药物、EDC、HOBT,活化半小时后再加入到溶有蛋白的PB缓冲液里,0℃反应24h。
主要问题是羧基药物不溶于水,即使活化后加入PB缓冲液里也会即刻出现沉淀,呈牛奶状浑浊液,各位大神有什么好的方法吗?
反应过程还有其他需要注意的问题吗?跪谢~
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2016-05-30 15:55:38
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虫号: 2976488
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26楼
:
Originally posted by
1396522659
at 2016-05-30 22:04:31
不好意思,说的有问题,增加溶解的有机溶剂用量,最好用DMSO或DMF溶解药物,用PB溶解蛋白质,使有机溶剂与PB的比例为2:1,再试试
嗯,谢谢回答。但是增加有机溶剂的比例会使蛋白析出来,我的蛋白是一种小分子量的酶
发自小木虫Android客户端
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33楼
2016-05-31 00:24:05
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