| 查看: 5063 | 回复: 15 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
Dugutoufu铜虫 (初入文坛)
|
[求助]
运用crispr/cas9进行基因敲除，pCas质粒总是无法转进感受态中，求大神的指导啊~ 已有2人参与
|
|
产气肠杆菌与大肠杆菌的同源性很高，理论上可以进行crispr基因敲除，但是我将pCas电转了很多次，还是转不进去，制备的感受态没有问题，质粒浓度大约200ng，电转的条件是：2200V，200Ω，25uF，2mm的电转杯，电转时间大概在5毫秒左右，菌体在抗性板上长，抗性板是kan50，大约18个小时之后能长出菌落。挑取单菌落在同样抗性的液体里也能长，但是再提取质粒验证时，完全提不出来，想请问各路大神这是什么原因啊？做了两个月~~ 求大神们提提意见 @youlinglyw@wizardfan@飞约疯人院@biostar2009 |
回复此楼» 猜你喜欢
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有251人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有17人回复
-
散金
已经有54人回复
Bioexperixgs
新虫 (正式写手)
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 672.9
- 散金: 337
- 红花: 8
- 帖子: 330
- 在线: 39.2小时
- 虫号: 2330746
- 注册: 2013-03-08
- 专业: 病原微生物变异与耐药
9楼2016-05-29 09:18:48
黄小萌萌
银虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 310.2
- 散金: 1
- 帖子: 122
- 在线: 77.7小时
- 虫号: 4085495
- 注册: 2015-09-19
- 性别: MM
- 专业: 肿瘤化学药物治疗
2楼2016-05-26 10:43:35
黄小萌萌
银虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 310.2
- 散金: 1
- 帖子: 122
- 在线: 77.7小时
- 虫号: 4085495
- 注册: 2015-09-19
- 性别: MM
- 专业: 肿瘤化学药物治疗
3楼2016-05-26 10:44:31
Dugutoufu
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 11.5
- 帖子: 13
- 在线: 36.5小时
- 虫号: 4440297
- 注册: 2016-02-27
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
★ ★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-15 07:58:14
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-15 07:58:33
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-15 07:58:14
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-08-15 07:58:33
|
kan没有失效呢～我的质粒有点大，12.5k 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2016-05-26 19:29:16
40