24小时热门版块排行榜    

查看: 904  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

絮燕菲菲

新虫 (小有名气)

[求助] 转化问题 已有3人参与

做转化之前没出现什么差错,都是按照标准步骤来的,但是这个星期不管我重复多少次,都没有长出菌落,好不容易长出的菌落是空载,我是先用T载体连接以后再转化的,刚开始以为是转化出了问题,但是重复了三次都没有长出菌落,会不会是我切胶回收时候把A尾巴弄掉了,根本就没有连上啊,不是转化的问题。。请求大家支招

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaohuaibing

铁杆木虫 (著名写手)

首先跑胶时,尽量低电压,时间久点跑。 让条带分开的宽,好切,最好点2孔重复样,回收2孔的胶。用的是什么酶 ? 我也正在做,长出菌落了
每天都在读书和读人。书易懂,人难解。
4楼2016-05-28 00:22:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

黄小萌萌

银虫 (小有名气)


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰·手有余香,谢谢你的理解与支持。myprayer祝您科研顺利,文章多多。 2016-05-26 17:54:33
有没有做对照?没有对照的话,出现问题不好说

发自小木虫Android客户端
2楼2016-05-26 10:02:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yesucao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、Taq酶是高保真还是普通的呢?普通的不需要加A,高保真的需要加A;
2、PCR产物有多大,PCR产物切胶纯化后,是否电泳检测有条带呢?浓度大致有多少?
3、连接时根据PCR产物的大小和浓度,大致判断模板加入量,连接时间和温度正常;
4、转化时除考虑实验操作外,确保感受态没有问题;
5、菌液涂板时抗生素类型和浓度要求确保没有问题。
3楼2016-05-26 21:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kingjazz23

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉做TA克隆一般很难做不出来,切胶回收也不会把A弄掉,你的连接体系是什么?检查一下连接酶有没有问题,做个对照。
5楼2016-05-28 14:07:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工 322求调剂 +6 然11 2026-03-19 6/300 2026-03-25 18:37 by haxia
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 总分293求调剂 +4 加一一九 2026-03-25 4/200 2026-03-25 12:56 by Dyhoer
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +15 吃吃吃才有意义 2026-03-19 16/800 2026-03-24 19:51 by 了了了了。。
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
请填处理意见