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fqp603748

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光免疫层析法求助 已有1人参与

本人刚充实荧光免疫层析法,发现荧光微球的均一性和重复性太差了,而且假阳太高了,现在应该怎么消除假阳?
另外有什么办法提高一下荧光微球的均一程度,我是用划膜机喷的,划膜上抗体的浓度都是1mg/ml,之前T线抗体浓度是2mg/ml,假阳更高?现在有没有办法通过改变稀释液,或者复溶液或者样品垫等消除假阳?
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流水有意56

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可能是你T线包被抗体浓度太高,属于钩状效应(前带反应),建议稀释包抗浓度。BSA可以起到封闭作用,吐温则增加释放。
吃得苦中苦,方为人上人!
7楼2016-07-13 16:42:46
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樱桃罐头啊

新虫 (正式写手)

你用的是什么类型的微球?

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14楼2016-10-27 20:13:20
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一盏离愁.xx

金虫 (小有名气)


fqp603748(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢参与交流 2016-06-03 12:39:22
微球欧联有问题,假阳性,要么稀释液不对,要么抗体有问题

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2楼2016-06-01 23:32:06
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fqp603748

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 一盏离愁.xx at 2016-06-01 23:32:06
微球欧联有问题,假阳性,要么稀释液不对,要么抗体有问题

稀释液可以加点什么消除假阳,我试了加牛血清!降低了一点,但不完全,还有别的办法吗

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3楼2016-06-14 08:38:29
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一盏离愁.xx

金虫 (小有名气)

在划膜液中加点BSA,0.1~0.5%

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4楼2016-06-15 06:41:38
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fqp603748

新虫 (初入文坛)

您说的在划膜抗体中加点BSA吗?我试试

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5楼2016-06-16 11:16:32
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四小姐OPP

新虫 (正式写手)

你的划膜抗体量好大啊,我C线才0.2.你做的啥微球呀
6楼2016-07-05 18:28:25
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fqp603748

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 流水有意56 at 2016-07-13 16:42:46
可能是你T线包被抗体浓度太高,属于钩状效应(前带反应),建议稀释包抗浓度。BSA可以起到封闭作用,吐温则增加释放。

T线用的是1mg/ml的,每20ul微球里加了45ul

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8楼2016-07-13 19:10:53
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fqp603748

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 四小姐OPP at 2016-07-05 18:28:25
你的划膜抗体量好大啊,我C线才0.2.你做的啥微球呀

可能我们的抗体质量不好哈哈

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9楼2016-07-13 19:11:17
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流水有意56

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by fqp603748 at 2016-07-13 19:10:53
T线用的是1mg/ml的,每20ul微球里加了45ul
...

提高标记抗体的比例对重复性(CV),线性范围都有很大的改善,
吃得苦中苦,方为人上人!
10楼2016-07-14 10:36:31
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