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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 工艺研究 » 荧光免疫层析法求助
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fqp603748

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光免疫层析法求助 已有1人参与

本人刚充实荧光免疫层析法，发现荧光微球的均一性和重复性太差了，而且假阳太高了，现在应该怎么消除假阳？
另外有什么办法提高一下荧光微球的均一程度，我是用划膜机喷的，划膜上抗体的浓度都是1mg/ml，之前T线抗体浓度是2mg/ml，假阳更高？现在有没有办法通过改变稀释液，或者复溶液或者样品垫等消除假阳？
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1楼 2016-05-24 09:49:08
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流水有意56

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可能是你T线包被抗体浓度太高，属于钩状效应（前带反应），建议稀释包抗浓度。BSA可以起到封闭作用，吐温则增加释放。
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吃得苦中苦，方为人上人！
7楼2016-07-13 16:42:46
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樱桃罐头啊

新虫 (正式写手)
你用的是什么类型的微球？

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14楼2016-10-27 20:13:20
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普通回帖

一盏离愁.xx

金虫 (小有名气)
★
fqp603748(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢参与交流 2016-06-03 12:39:22
微球欧联有问题，假阳性，要么稀释液不对，要么抗体有问题

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2楼2016-06-01 23:32:06
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fqp603748

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 一盏离愁.xx at 2016-06-01 23:32:06
微球欧联有问题，假阳性，要么稀释液不对，要么抗体有问题

稀释液可以加点什么消除假阳，我试了加牛血清！降低了一点，但不完全，还有别的办法吗

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3楼2016-06-14 08:38:29
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一盏离愁.xx

金虫 (小有名气)
在划膜液中加点BSA，0.1～0.5%

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4楼2016-06-15 06:41:38
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fqp603748

新虫 (初入文坛)
您说的在划膜抗体中加点BSA吗？我试试

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5楼2016-06-16 11:16:32
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四小姐OPP

新虫 (正式写手)
你的划膜抗体量好大啊，我C线才0.2.你做的啥微球呀
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6楼2016-07-05 18:28:25
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fqp603748

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 流水有意56 at 2016-07-13 16:42:46
可能是你T线包被抗体浓度太高，属于钩状效应（前带反应），建议稀释包抗浓度。BSA可以起到封闭作用，吐温则增加释放。

T线用的是1mg/ml的，每20ul微球里加了45ul

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8楼2016-07-13 19:10:53
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fqp603748

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 四小姐OPP at 2016-07-05 18:28:25
你的划膜抗体量好大啊，我C线才0.2.你做的啥微球呀

可能我们的抗体质量不好哈哈

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9楼2016-07-13 19:11:17
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流水有意56

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by fqp603748 at 2016-07-13 19:10:53
T线用的是1mg/ml的，每20ul微球里加了45ul
...

提高标记抗体的比例对重复性（CV），线性范围都有很大的改善，
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吃得苦中苦，方为人上人！
10楼2016-07-14 10:36:31
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