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mike546至尊木虫 (正式写手)
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[求助]
关于引物设计/荧光定量PCR的几个问题请教一下大家 已有1人参与
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楼主环境专业,初次接触分子实验,提的是植物的RNA,然后反转录成cDNA,再去荧光定量有几个问题想请教一下大家: (1)提出RNA之后,测了OD260,然后控制每个样品RNA浓度一致,那反转录后还要测280260的比值吗,不测的话,反转录过程会不会有影响?测的话那之前的RNA 的OD260可以不测嘛 (2)引物设计的时候,在NCBI上,进入某个基因的mRNA的详细信息,要把序列复制到设计软件上,那这个序列是这条mRNA的整段序列还是点一下“CDS”然后下面有颜色标注的那一段呢? (3)如果想做土壤里面的基因,按照这个路线然后去荧光定量可行吗?直接用提DNA的试剂盒提取土壤的DNA为什么不能拿去荧光定量呢? 几个很小白的问题,初次接触,大家见笑了,恳请大家帮帮忙,感激不尽! |
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mike546
至尊木虫 (正式写手)
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