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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

[求助] 超声波破碎大肠杆菌试剂和条件 已有1人参与

本人用BL21(DE3)表达重组蛋白,下一步准备大量培养离心得到菌体。然后用超声波破碎,因为没有用过,求大神告知方法?
还有菌体是否需要加细胞裂解液,PMSF,PBS,Tris之类的试剂再超声破碎。
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

文献里有加PBS的,有加Tris的,问别人又有说加细胞裂解液和PMSF的
2楼2016-05-18 10:45:38
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030Selma

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 凯伦爱佳佳 at 2016-05-18 10:45:38
文献里有加PBS的,有加Tris的,问别人又有说加细胞裂解液和PMSF的

PMSF的作用是抑制蛋白酶的作用,防止过表达的蛋白质被降解了。至于选择的lysis buffer可以参照你后续纯化的时候用的填料的说明书~

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-05-18 10:56:50
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