24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2241  |  回复: 2

凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

[求助] 超声波破碎大肠杆菌试剂和条件已有1人参与

本人用BL21(DE3)表达重组蛋白,下一步准备大量培养离心得到菌体。然后用超声波破碎,因为没有用过,求大神告知方法?
还有菌体是否需要加细胞裂解液,PMSF,PBS,Tris之类的试剂再超声破碎。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

文献里有加PBS的,有加Tris的,问别人又有说加细胞裂解液和PMSF的
2楼2016-05-18 10:45:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

030Selma

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 凯伦爱佳佳 at 2016-05-18 10:45:38
文献里有加PBS的,有加Tris的,问别人又有说加细胞裂解液和PMSF的

PMSF的作用是抑制蛋白酶的作用,防止过表达的蛋白质被降解了。至于选择的lysis buffer可以参照你后续纯化的时候用的填料的说明书~

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-05-18 10:56:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 凯伦爱佳佳 的主题更新
信息提示
请填处理意见