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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 超声波破碎大肠杆菌试剂和条件
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

[求助] 超声波破碎大肠杆菌试剂和条件 已有1人参与

本人用BL21（DE3）表达重组蛋白，下一步准备大量培养离心得到菌体。然后用超声波破碎，因为没有用过，求大神告知方法？
还有菌体是否需要加细胞裂解液，PMSF，PBS,Tris之类的试剂再超声破碎。
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1楼 2016-05-18 10:21:09
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)
文献里有加PBS的，有加Tris的，问别人又有说加细胞裂解液和PMSF的
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2楼2016-05-18 10:45:38
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030Selma

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 凯伦爱佳佳 at 2016-05-18 10:45:38
文献里有加PBS的，有加Tris的，问别人又有说加细胞裂解液和PMSF的

PMSF的作用是抑制蛋白酶的作用，防止过表达的蛋白质被降解了。至于选择的lysis buffer可以参照你后续纯化的时候用的填料的说明书~

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3楼2016-05-18 10:56:50
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