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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 标准曲线终点荧光信号值不一样怎么回事？
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yokina

新虫 (初入文坛)

[求助] 标准曲线终点荧光信号值不一样怎么回事？ 已有1人参与

做的四个10倍稀释的梯度，第三梯度信号值太低了，第四梯度完全没有信号了……跪求大神们帮帮忙！

标准曲线终点荧光信号值不一样怎么回事？


@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-05-16 16:50:46
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a314919473

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

这个探针法多重PCR没有接触过，不过原理上完全可行。
无论是预实验还是正式实验都建议使用三重复，试剂很便宜的一个反应成本就是1-2元。
探针法都有这种通病就是平台期不会在一起，可以使用饱和染料做下，效果会好些。
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有你真好
9楼2016-05-19 15:06:56
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许彦

木虫 (正式写手)
说明你设计的反应灵敏度不好。

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

yokina
2楼2016-05-17 05:36:40
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yokina

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 许彦 at 2016-05-17 05:36:40
说明你设计的反应灵敏度不好。

需要怎么再优化呢？

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3楼2016-05-17 06:38:13
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许彦

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yokina at 2016-05-17 06:38:13
需要怎么再优化呢？
...

这个我不会，我是做技术支持的，不是做研发的，我说的也只是一种可能，可以考虑换个高效的酶

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4楼2016-05-18 07:07:39
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