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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 亚细胞定位～共定位
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liuying1987

新虫 (初入文坛)

[交流] 亚细胞定位～共定位 已有2人参与

求助……想做一个植物蛋白的亚细胞定位～预测是核蛋白，有人说我必须要共定位……就是多加一个核蛋白maker ,请问各位必须这样吗？做普通的荧光和明场……以空载为对照不能说明问题吗？

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1楼 2016-05-12 22:17:45
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sunguangchao

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用细胞核染色剂做共定位就好了啊，比如DAPI， syto,
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仍然自由自我，永远高唱我歌，走遍千里
2楼2016-05-13 02:40:48
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liuying1987

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sunguangchao at 2016-05-13 02:40:48
用细胞核染色剂做共定位就好了啊，比如DAPI， syto,

谢谢你……那操作的话是在完成gfp融合蛋白的转化后……再加一步dapi染色然后双通道检测对吗？

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3楼2016-05-13 17:12:55
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sunguangchao

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuying1987 at 2016-05-13 17:12:55
谢谢你……那操作的话是在完成gfp融合蛋白的转化后……再加一步dapi染色然后双通道检测对吗？
...

对， 用共聚焦显微镜能够很清晰的分辨DAPI 染色跟GFP。
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仍然自由自我，永远高唱我歌，走遍千里
4楼2016-05-14 00:40:25
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你要先确定自己想看的是活细胞还是固定后的细胞，做亚细胞定位怎么看都可以
但是dapi只能用于固定后的细胞，gfp想要看荧光是要看活细胞的，除非你用gfp抗体
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
5楼2016-05-17 00:28:58
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