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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 双酶切切不开
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博克侬浮码

银虫 (小有名气)

[求助] 双酶切切不开 已有1人参与

做双酶切，用的NEB的Bgl II和Nsil ，两种酶都是同一种buffer3.1，但是为啥死活切不开，双酶切体系20ul与50ul的都试过了，实在找不出原因。
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1楼 2016-05-05 17:08:42
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博克侬浮码

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2016-05-05 18:24:22
1）怎么确定切不开？是没有掉下来目的片段还是啥情况呢？
2）切不开就分步单酶切
3）是做酶切连接吗？是的话，这对酶选的真不好

质粒是其他实验室的师姐给的，用他的用两种酶分别单酶切能切开，双酶切切不开，我把他给的质粒转到细菌里，再提质粒，单酶切双酶切都切不开，难道是我提的质粒有问题？但是质粒已经提好多遍了还是切不开，愁死了，中提，小提都试过了
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16楼2016-05-10 18:15:15
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查看全部 19 个回答

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
1）怎么确定切不开？是没有掉下来目的片段还是啥情况呢？
2）切不开就分步单酶切
3）是做酶切连接吗？是的话，这对酶选的真不好
赞一下(2人) 回复此楼
Let God do with it as He wills
2楼2016-05-05 18:24:22
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娟恋幸福

新虫 (小有名气)
我用Bgl ll和SalI也是切不开，都快愁死了

发自小木虫Android客户端
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3楼2016-05-05 23:49:30
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shuimu911

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2016-05-05 23:57:16
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