24小时热门版块排行榜    

查看: 1911  |  回复: 18
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

博克侬浮码

银虫 (小有名气)

[求助] 双酶切切不开 已有1人参与

做双酶切,用的NEB的Bgl II和Nsil ,两种酶都是同一种buffer3.1,但是为啥死活切不开,双酶切体系20ul与50ul的都试过了,实在找不出原因。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunguangchao

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 博克侬浮码 at 2016-05-08 17:01:15
没掉下来目的片段,单酶切开始能切开,后来也切不开了...

如果是之前单酶切能切开,后来切不开了说明很大可能,你的酶活性降低了, 或者干脆失活了,建议你首先再次验证之前能切开的单酶切反应,然后够买新酶。 双酶切同时不work的时候建议分别进行单酶切。
仍然自由自我,永远高唱我歌,走遍千里
15楼2016-05-10 05:22:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

1)怎么确定切不开?是没有掉下来目的片段还是啥情况呢?
2)切不开就分步单酶切
3)是做酶切连接吗?是的话,这对酶选的真不好
Let God do with it as He wills
2楼2016-05-05 18:24:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

娟恋幸福

新虫 (小有名气)

我用Bgl ll和SalI也是切不开,都快愁死了

发自小木虫Android客户端
3楼2016-05-05 23:49:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuimu911

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

4楼2016-05-05 23:57:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见