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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 电泳分离胶浓度的选择？
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living1219

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳分离胶浓度的选择？

我一块胶上一共跑四种蛋白，分子量分别是18、66、79、25KDa。我应该选择多大浓度的胶？
另外我跑出的胶，一个泳道中应该有两种蛋白，但是只跑出来一种，另一种跑不出来，两种蛋白分子量分别是79和35KDa这个要怎么破？跟我没有空泳道加上样缓冲液有没有关系？求大神救我
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1楼 2016-05-04 22:20:02
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ahbbgzrq

木虫 (小有名气)
18KDa到少要12%的胶。

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2楼2016-05-04 23:14:01
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living1219

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ahbbgzrq at 2016-05-04 23:14:01
18KDa到少要12%的胶。

我今天又换了12%和15%的胶再跑，结果那种蛋白还是没跑出来。有没有办法？
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3楼2016-05-05 21:44:47
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helpwater

新虫 (小有名气)
我用的12%的分离胶，你这些都能跑出来的。不知道你的上样量是多少，浓度如何？有时候上样量和浓度都对出现不出现有关系。

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4楼2016-05-06 01:53:55
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living1219

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by helpwater at 2016-05-06 01:53:55
我用的12%的分离胶，你这些都能跑出来的。不知道你的上样量是多少，浓度如何？有时候上样量和浓度都对出现不出现有关系。

我每孔上样0.15ug/ul 上样10ul。帮我分析分析，谢谢啦！
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5楼2016-05-06 09:57:47
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新医黄药师

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by living1219 at 2016-05-06 09:57:47
我每孔上样0.15ug/ul 上样10ul。帮我分析分析，谢谢啦！...

上样太少了，我2.0维克每微升，上样15微升

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6楼2016-05-09 11:00:56
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