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有关于α-淀粉酶酶活的问题已有4人参与
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小虫现在要做α-淀粉酶酶解，用的酶制剂是上上一级师姐用剩下的，在sigma买的，上面标的酶活是380U/mg，主要问题有以下几点： 1.酶是干粉状的，置放于4℃冰箱内，过了两年酶活是否发生了很大的变化。 2.如果酶活变了的话，是否要重新测定，测定方法是什么样子的，网上搜到的方法都是测定植物提取酶液的，不知道这种买来的酶制剂酶活怎么测定。 3.网上的酶活力测定方法都不相同，有以酶量表征的，以生成还原糖量表征的，也有以一定时间内液化淀粉量表征的，我很晕呐，是不是酶活力单位每篇文章每个实验中都不相同，都是自己规定的呢？ 查了好几天越来越困惑，希望各位前辈多多指点，感激不尽。 |
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8楼2016-05-04 15:55:28
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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回答第一个问题：可以使用。 α-淀粉酶 英文：a-Amylase活力：1万CAS：9000-90-2。 概述：中温α-淀粉酶采用枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)经深层发酵提炼而成。广泛应用于酒精、啤酒、味精、淀粉糖、发酵工业的液化以及纺织、印染退浆等。 性状：白色粉末。 原理：能水解淀粉分子中的α-1.4葡萄糖苷键，任意切断成长短不一的短链糊精及少量的低分子糖类，直链淀粉和支链淀粉均以无规则的形式进行分解，从而使淀粉糊的粘度迅速下降，即“液化”作用，故又称液化酶。 产品特性：1、热稳定性：在60οC以下较为稳定，最适作用温度60 -70οC，可适用于最高达90οC的液化过程。2、PH稳定性：在PH6.0-7.0时较稳定，最适PH6.0，PH5.0以下失活严重。3、钙离子浓度对酶活力的影响：钙离子对酶活力的稳定性有提高作用，没有钙离子，酶活力完全丧失。 应用：1、在饴糖、酶法味精上的应用 淀粉浆浓度为16-17B，调PH至6.2-6.4，并加入0.2%氯化钙(按原料重量计算)，然后将淀粉酶加入淀粉浆中(每克原料用酶6-8个单位)，充分混合后，加热至85 -90οC，液化30分钟左右。 2、在啤酒生产上的应用 使用大米、玉米为辅料时先磨粉通过40目以上筛孔，在糊化锅中调浆后加淀粉酶，加酶量在6个单位/克原料左右，在85 -90οC液化30分钟。 3、在纺织品退浆上的应用 使用精制的液体淀粉酶作为退浆剂，适用于不耐高温的丝绸、化纤、棉毛织品的退浆工艺，加酶量在0.2%(2000u/g)左右，在水浴50 -80οC 20-40分钟。 4、其它工业 一般控制在加酶量在每克淀粉6-8个酶活力单位，钙离子浓度150ppm。 储存：本品系生物活性物质，日光、温度、湿度要引起酶失活。应防止太阳直晒，宜放在低温干燥处。 |
2楼2016-05-03 20:48:18
3楼2016-05-04 08:46:44
lovibond
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4楼2016-05-04 08:54:17
送红花一朵|
感谢您的回帖，几种表征都可以，那么几种方法表示的酶活有没有相互之间的可比性，跟其它研究者的实验有没有可比性呢？ 还有您的意思是不是酶活还是自己再重测一下比较好。 感谢前辈的指导。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-05-04 09:19:09
robinletter
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6楼2016-05-04 10:56:18
lovibond
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7楼2016-05-04 12:46:10
9楼2016-05-04 15:56:11
lovibond
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10楼2016-05-04 16:39:16