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mayiboa

金虫 (小有名气)

[求助] 有关于α-淀粉酶酶活的问题已有4人参与

小虫现在要做α-淀粉酶酶解,用的酶制剂是上上一级师姐用剩下的,在sigma买的,上面标的酶活是380U/mg,主要问题有以下几点:
1.酶是干粉状的,置放于4℃冰箱内,过了两年酶活是否发生了很大的变化。
2.如果酶活变了的话,是否要重新测定,测定方法是什么样子的,网上搜到的方法都是测定植物提取酶液的,不知道这种买来的酶制剂酶活怎么测定。
3.网上的酶活力测定方法都不相同,有以酶量表征的,以生成还原糖量表征的,也有以一定时间内液化淀粉量表征的,我很晕呐,是不是酶活力单位每篇文章每个实验中都不相同,都是自己规定的呢?
查了好几天越来越困惑,希望各位前辈多多指点,感激不尽。
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lovibond

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【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by mayiboa at 2016-05-04 09:19:09
感谢您的回帖,几种表征都可以,那么几种方法表示的酶活有没有相互之间的可比性,跟其它研究者的实验有没有可比性呢?
还有您的意思是不是酶活还是自己再重测一下比较好。
感谢前辈的指导。
...

要重新测的。至于比较,和谁比用一样的方法即可。

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充实的活着!
7楼2016-05-04 12:46:10
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mayiboa

金虫 (小有名气)

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引用回帖:
6楼: Originally posted by robinletter at 2016-05-04 10:56:18
需要重新测一下酶活,按Sigma产品的货号,到sigma网站看看产品介绍,应该有酶活力的定义,即测定条件。

感谢您的回帖,sigma官网上果然有定义,在这贴出来,希望对其它虫友有帮助。
有关于α-淀粉酶酶活的问题



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8楼2016-05-04 15:55:28
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Isabella_Z

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
回答第一个问题:可以使用。
α-淀粉酶
英文:a-Amylase活力:1万CAS:9000-90-2。
概述:中温α-淀粉酶采用枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)经深层发酵提炼而成。广泛应用于酒精、啤酒、味精、淀粉糖、发酵工业的液化以及纺织、印染退浆等。
性状:白色粉末。
原理:能水解淀粉分子中的α-1.4葡萄糖苷键,任意切断成长短不一的短链糊精及少量的低分子糖类,直链淀粉和支链淀粉均以无规则的形式进行分解,从而使淀粉糊的粘度迅速下降,即“液化”作用,故又称液化酶。
产品特性:1、热稳定性:在60οC以下较为稳定,最适作用温度60 -70οC,可适用于最高达90οC的液化过程。2、PH稳定性:在PH6.0-7.0时较稳定,最适PH6.0,PH5.0以下失活严重。3、钙离子浓度对酶活力的影响:钙离子对酶活力的稳定性有提高作用,没有钙离子,酶活力完全丧失。
应用:1、在饴糖、酶法味精上的应用 淀粉浆浓度为16-17B,调PH至6.2-6.4,并加入0.2%氯化钙(按原料重量计算),然后将淀粉酶加入淀粉浆中(每克原料用酶6-8个单位),充分混合后,加热至85 -90οC,液化30分钟左右。
2、在啤酒生产上的应用 使用大米、玉米为辅料时先磨粉通过40目以上筛孔,在糊化锅中调浆后加淀粉酶,加酶量在6个单位/克原料左右,在85 -90οC液化30分钟。
3、在纺织品退浆上的应用 使用精制的液体淀粉酶作为退浆剂,适用于不耐高温的丝绸、化纤、棉毛织品的退浆工艺,加酶量在0.2%(2000u/g)左右,在水浴50 -80οC 20-40分钟。
4、其它工业 一般控制在加酶量在每克淀粉6-8个酶活力单位,钙离子浓度150ppm。
储存:本品系生物活性物质,日光、温度、湿度要引起酶失活。应防止太阳直晒,宜放在低温干燥处。

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2楼2016-05-03 20:48:18
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mayiboa

金虫 (小有名气)

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引用回帖:
2楼: Originally posted by Isabella_Z at 2016-05-03 20:48:18
回答第一个问题:可以使用。
α-淀粉酶
英文:a-Amylase活力:1万CAS:9000-90-2。
概述:中温α-淀粉酶采用枯草芽孢杆菌(Bacillus Subtilis)经深层发酵提炼而成。广泛应用于酒精、啤酒、味精、淀粉糖、发酵工业 ...

感谢您的回复,可以使用但是它的酶活还能不能按照包装上标明的计算,还是要重测,还有具体的方法能否告知,谢谢。

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3楼2016-05-04 08:46:44
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lovibond

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以用,配成溶液,现用现配。
几种表征都可以,能和你需要的其他数据对应起来就行。

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充实的活着!
4楼2016-05-04 08:54:17
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mayiboa

金虫 (小有名气)

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引用回帖:
4楼: Originally posted by lovibond at 2016-05-04 08:54:17
可以用,配成溶液,现用现配。
几种表征都可以,能和你需要的其他数据对应起来就行。

感谢您的回帖,几种表征都可以,那么几种方法表示的酶活有没有相互之间的可比性,跟其它研究者的实验有没有可比性呢?
还有您的意思是不是酶活还是自己再重测一下比较好。
感谢前辈的指导。

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5楼2016-05-04 09:19:09
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robinletter

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
需要重新测一下酶活,按Sigma产品的货号,到sigma网站看看产品介绍,应该有酶活力的定义,即测定条件。

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6楼2016-05-04 10:56:18
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mayiboa

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by lovibond at 2016-05-04 12:46:10
要重新测的。至于比较,和谁比用一样的方法即可。
...

谢谢您的回复,收益良多。

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9楼2016-05-04 15:56:11
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lovibond

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引用回帖:
9楼: Originally posted by mayiboa at 2016-05-04 15:56:11
谢谢您的回复,收益良多。
...

不客气,多交流!

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充实的活着!
10楼2016-05-04 16:39:16
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