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scofield111

银虫 (正式写手)

[求助] 构建质粒转化酵母,长了一平板杂菌,求原因 已有1人参与

求大神们支招,头疼!

构建质粒转化酵母,长了一平板杂菌,求原因


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biosci

捐助贵宾 (职业作家)


加点氯霉素,估计是做感受态的时候污染

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2楼2016-04-28 12:52:51
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scofield111

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2016-04-28 12:52:51
加点氯霉素,估计是做感受态的时候污染

卡那可以么

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3楼2016-04-28 13:13:43
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夏日天国

新虫 (小有名气)

4楼2016-04-28 13:31:41
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)

加点儿抗生素,酵母菌对一般的抗生素不敏感,这样可以排除杂菌

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5楼2016-04-28 13:42:40
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傲娇小丫头

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我做的酵母用的载体是pPICZα A,所以平板加zeocin抗性。看起来像细菌,可以加(cefotaxime sodium,能够抑制大部分细菌生长
一万年太久,只争朝夕。。。。。
6楼2016-04-28 14:00:54
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scofield111

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 夏日天国 at 2016-04-28 13:31:41
你的质粒带抗性么?

抗氨苄的

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7楼2016-04-28 14:53:57
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scofield111

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 张凡云 at 2016-04-28 13:42:40
加点儿抗生素,酵母菌对一般的抗生素不敏感,这样可以排除杂菌

好,我加卡那试试

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8楼2016-04-28 14:55:31
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夏日天国

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by scofield111 at 2016-04-28 14:53:57
抗氨苄的
...

氨苄过期了么,还是浓度用低了,操作工作台灭菌久一点,这些都排除应该就是杂菌了,好多质粒都带氨苄,所以容易污染

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9楼2016-04-29 09:31:04
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scofield111

银虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 夏日天国 at 2016-04-29 09:31:04
氨苄过期了么,还是浓度用低了,操作工作台灭菌久一点,这些都排除应该就是杂菌了,好多质粒都带氨苄,所以容易污染
...

做酵母营养缺陷培养基没有加氨苄,12个小时就失效了,师兄没加,我也没加,想再划线挑单菌,

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10楼2016-04-29 10:10:35
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