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汕头大学海洋科学接受调剂
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回眸谁浅笑72

新虫 (正式写手)

[求助] 关于CAT测定 已有1人参与

测定CAT时,为什么样品吸光度一直是3没有变化,测定方法如下:取10ml试管,每管加入0.05 mol/L pH7.8 磷酸缓冲液1.5ml, 0.2ml酶液,1ml蒸馏水,25℃水浴锅预热3min 后,逐管加入0.3ml0.1mol/L H2O2,启动反应,立即读数。空白用缓冲液代替酶液。(石英比色皿)每测1min读数一次,共测4min。
计算:酶活性用每克鲜重样品1min内分解H2O2的毫克数表示(酶活性下降)
过氧化氢酶活性=(△A240.VT)* (0.1*V1*W*t)  [U*g-1]
△A240=A0-(A1+A2)/2
A0—对照吸光值; A1,A2—样品管吸光值;VT—酶液总量(ml);V1—反应所用酶液量(ml);W—样品鲜重(g);t—反应时间(min); 0.1:A240nm每下降0.1为1个酶活单位。

@starseacow 发自小木虫Android客户端
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潇洒的XMC

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是不是酶的活性太低,或者是这种检测方法有问题。你用的是紫外检测法。我最近也在测酶的活性,用的是钼酸铵比色法,样品的吸光度变化也很小。
2楼2016-06-16 16:46:58
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star013

新虫 (知名作家)


我们公司可以提供代测技术服务

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3楼2016-06-17 07:32:38
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wpaing513

新虫 (小有名气)

吸光度3是仪器问题,或者样品浓度太高

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4楼2016-07-09 21:03:31
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1994杨杨2016

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by 回眸谁浅笑72 at 2016-04-27 17:59:07
测定CAT时,为什么样品吸光度一直是3没有变化,测定方法如下:取10ml试管,每管加入0.05 mol/L pH7.8 磷酸缓冲液1.5ml, 0.2ml酶液,1ml蒸馏水,25℃水浴锅预热3min 后,逐管加入0.3ml0.1mol/L H2O2,启动反应,立即读 ...

我想问一下你的过氧化氢是线配现用吗

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5楼2016-08-15 09:18:23
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yoker6996

新虫 (初入文坛)

同问!我用酶标仪测240nm ,显示OVRFLW,说是溶液浓度太高,可一段时间后,过氧化氢也被反应得差不多了吧 ,浓度也降低了,可还是显示OVRFLW

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6楼2016-08-17 17:33:23
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tanglianfa

金虫 (著名写手)

这个公式,最后出来数据,也不知道怎么带进去
7楼2020-10-23 12:09:55
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