| 查看: 1030 | 回复: 2 | ||
[求助]
基因敲除实验，急需帮助，谢谢啦！
|
|
我已经做基因敲除试验半年了，利用质粒pUC19构建用于基因敲除的自杀质粒，抗生素抗性基因为cm，构建好重组质粒，然后进行电转，以获得同源重组菌，重复了多次，每次都能长出几个菌落，但敲除后挑单菌落摇菌用PCR扩增，能扩增出cm片段和目的片段，但是缺失片段也能扩增出，传代几次PCR结果与之相似，而且做Western blot也能检测到目的蛋白，难道cm基因插入非目标片段处，没有同源重组掉吗？请问导致这种情况的原因是啥？如何解决？非常感谢! [ Last edited by 鱼虾水中游 on 2016-4-27 at 17:25 ]@biostar2009 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有252人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
2楼2017-06-02 10:14:35
18240090216
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 62.4
- 散金: 8
- 帖子: 40
- 在线: 16.8小时
- 虫号: 4438624
- 注册: 2016-02-26
- 专业: 基础兽医学
3楼2018-03-28 13:55:18